多由结构改造来，可能带来原料、中间体、异构体、降解产物以及试剂溶剂等，是一重要项目。此外，有些甾体药物还规定其他检查项目。
一、游离磷酸
示例 中国药典收载地塞米松磷酸钠的检查，方法为：
称取供试品20mg，置25ml量瓶中，加水15ml溶解；另取标准磷酸盐溶液[精密称取经105℃干燥2h的磷酸二氢钾0.35g，置1000ml量瓶中，加硫酸溶液（3→10）10ml与水适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀；临用时再稀释10倍]4.0ml，置另一25ml量瓶中，加水11ml；各精密加钼酸铵硫酸试液2.5ml与1-氨基-2萘酚-4-磺酸溶液（另取无水亚硫酸钠5g，亚硫酸氢钠94.3G与1-氨基-萘酚-4-磺酸0.7g，充分混合，临用时取此混合物1.5g加水10ml使溶解，必要时过滤）1ml，加水至刻度，摇匀，在20℃放置30~50min，在740nm的波长处测定考试，大收集整理吸收度。供试品溶液的吸收度不得大于对照溶液的吸收度。
原理：酸性条件下，磷酸与钼酸作用生成磷钼酸铵，再经还原形成磷钼酸蓝（钼蓝），在740nm波长处有最大吸收。
二、甲醇和丙酮
示例 地塞米松磷酸钠方法：
精密量取甲醇10μl（相当于7.9mg）与丙酮100μl（相当于79mg），置100ml量瓶中，精密加0.1%（ml/ml）正丙醇（内标物质）溶液20ml，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照液；另取本品月约0.16g，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入上述内标溶液2ml，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品。取上述溶液，照气相色谱法，用高分子多孔小球色谱柱（按正丙醇计算的理论板数应大于700），在柱温150℃测定。含丙酮不得过5.0%（g/g），并不得出现甲醇峰。
本品在生产工艺中使用大量甲醇和丙酮，因此要检查。甲醇的检测限为3.1ng.
三、雌酮
炔雌酮中雌酮检查方法如下：
取本品5mg溶于0.5ml乙醇，加间二硝基苯0.05g，再加新配制的稀氢氧化钾-乙醇液0.5ml，在暗处放置1h后，再加乙醇10ml
时，溶液呈现的颜色不得比下面的对照液更深。
对照液：不加本品同样方法制成。
原理：Zimmermann反应，羰基的邻位具有活泼亚甲基的化合物，在碱性的氢氧化钾乙醇溶液中，与间二硝基苯反应呈红~蓝色。雌酮是17-酮甾类，因此根据该反应生成紫红色化合物，必须使用高纯度的间二硝基苯，否则呈褐色而难于判定。
四、硒
五、其他甾体
甾体激素药物多由甾体母体或结构类似的其他甾体激素制备而来，也具有一定的药理作用而又互相不相同，使其他甾体或有关物质的限度检查显得非常必要，成为甾体激素药物纯度检查的一个重要项目。TLC和HPLC为各国近版药典采用36中原料中34中采用薄层色谱法检查；10中原料已采用HPLC法。
薄层色谱法药典色谱条件：
1.薄层板：大多采用硅胶G板，少数采用硅胶GF254或硅胶HF254.
2.供试液和对照液的制备：取一定量供试品和对照品，分别用溶剂（如氯仿-甲醇或甲醇或氯仿或丙酮）配成一定浓度的溶液。
3.展开剂系统：各种不同比例的二氯甲烷-乙醚-甲醇-水混合溶剂用得最多；还有苯、无水乙醇、二氯甲烷-甲醇-水、氯仿-甲醇、二氯甲烷-醋酸甲酯-水、苯-丙酮等混合溶剂。
4.显色剂：碱性四氮唑蓝试液；硫酸-乙醇（2：8或1：1或3：7）；20%硫酸；10%磷钼酸-乙醇液。
5.检测法：用碱性四氮唑蓝试液作显色剂时，以展开剂展开后，晾干，在105℃干燥10min，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立即检视；用硫酸-乙醇显色剂时，以展开剂展开后，晾干，喷以硫酸-乙醇，在120℃或100℃加热5min，放冷置紫外光灯（365nm）下检视；用20%硫酸显色时，用展开剂展开后，晾干，喷以20%硫酸显色，在105℃加热10min后检视；用10%磷钼酸-乙醇液时，以展开剂展开后，晾干，喷以10%磷钼酸-乙醇液，在100℃加热10~15min，在日光下检视；某些甾体激素药物，如醋酸去氧皮质酮、地塞米松磷酸钠、倍他米松磷酸钠等采用硅胶GF254薄层板，用展开剂展开后，晾干，直接在紫外灯（254nm）下检视。
判定法：按各药品项下规定得杂质斑点的数目和颜色的要求进行判定。
（二）高效液相色谱法 色谱条件如下：
1.色谱填充柱：十八烷基硅烷键和硅胶。
2.流动相：各种不同比例的甲醇-水混合溶剂。
3.检测器：紫外（214nm，254nm，281nm，230nm，288nm）。
4.供试液和对照液的制备：将供试品用甲醇溶解配制成高（1）、低（2）二种浓度的溶液。
5.判定法：溶液
（1）显示的杂质峰数不得超过1个或3个或4个等；各杂质峰面积剂其总和不得大于溶液
（2）主峰面积的1/2或3/4或杂质峰面积不得大于溶液
2）主峰面积的3/4（如：黄体酮）。
即按各药品项下规定的杂质峰的数目和面积的要求进行判定。
责任编辑：张瑶
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