手术区皮肤消毒后，即开始铺盖灭菌敷料。一般铺巾法，虽能起一定的伤口隔离作用，但其缺点有：①纺织物有透水性，较易通过细菌。②伤口并未与周围皮肤严密隔离。③反复使用巾钳固定，使手术巾有许多小孔。
为了弥补以上缺点，目前，许多医院采用在切口皮肤上加用一次性无菌手术薄膜（有的含有碘伏）的方法，切开皮肤后薄膜仍粘附于伤口边缘，可防止皮肤上尚存的细菌在术中进入伤口。为了减少灭菌敷料与消毒水平的皮肤接触，铺巾前先由戴好灭菌手套的器械士，在消毒的手术区皮肤上粘贴薄膜，然后再铺盖灭菌敷料。如果仍用传统的手术巾，则应尽量妥善固定和保持干燥。
国内医院普遍采用无菌布料铺盖，国外较普遍采用一次性敷料。此敷料我国已有制造，因成本高，没能普遍应用，有的医院仅用于感染性手术。如果使用一次性敷料敷盖手术区，其铺巾方法基本相同。
1.铺单目的 除显露手术切口所必需的最小皮肤区之外，遮盖手术病人其它部位，使手术周围环境成为一个较大范围的无菌区域，以避免和尽量减少手术中的污染。
2.铺单原则 铺单时，既要避免手术切口暴露太小，又要尽量少使切口周围皮肤显露在外。手术区周围一般应有六层无菌巾遮盖，其外周至少有两层；小手术仅铺无菌孔巾一块即可。
3.铺单顺序 先铺四块治疗巾：通常先铺操作者的对面，或铺相对不洁区（如会阴部、下腹部和头部），最后铺靠近操作者的一侧（如腹部手术，铺盖顺序先下方、对侧、后上方、本侧或先下方、上方、后对侧、本侧）。再在上方、下方各铺一中单，最后铺盖大无菌单。
4.铺单范围 头端要铺盖过患者头部和麻醉架，两侧及足端应下垂超过手术台边缘30cm。
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