丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床诊断价值
来源:优易学  2011-12-23 15:30:34   【优易学:中国教育考试门户网】   资料下载   医药书店
 1 资料与方法

  1.1 标本来源 选取2006年11~12月我院住院及门诊患者血清样本91份,其中男44份,女47份;年龄13~79岁,平均年龄47.7岁。所有病例选择均符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会指定的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准,并排除合并感染其他病毒性肝炎,排除心、脑、肾、肺等器官疾病及高血压、糖尿病等。

  1.2 标本检测

  1.2.1 ELISA检测的简要步骤:取样本血清100 μl,加预处理液50 μl,56℃水浴30 min。酶标板每孔加入100 μl样品稀释液(包括空白,阴、阳对照孔,空白孔需加入200 μl样品稀释液);加入100 μl阴、阳对照孔于相应孔,其余孔各加入100 μl经预处理后的待测样品;37℃水浴振荡60 min。洗板6次。每孔加200 μl酶结合物,37℃水浴30 min,再洗板。最后显色剂A、B液各100 μl,37℃水浴避光显色10 min后加50 μl终止液。反应终止10 min内,以酶标仪450 nm波长测定各孔OD值。

  临界值(cut off)确定:阳性对照每孔OD值>0.6,阴性对照孔OD值<0.1时,测定结果有效,其临界值(cut off)为:阴性对照孔平均OD值+0.06。

  结果判定:待检测样品的OD值>临界值判定为HCV抗原阳性,<临界值判定为HCV抗原阴性。

  1.2.2 每份血清同时用ELISA法检测抗HCV,检测试剂由上海科华试剂公司提供。

  1.2.3 每份血清用ABI PRISM 7000PCR仪荧光定量逆转录聚合酶反应(PCR)检测HCV RNA含量,检测试剂由广州达安基因股份有限公司提供。

  1.2.4 每份血清用日本Olympus Au 2700全自动生化分析仪测定ALT浓度,检测试剂由第一化学药品株式会社提供。

  1.3 统计学分析 采用SAS 8.2统计软件进行统计学处理,计数资料比较采用进行χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

  2 结果

  2.1 62份HCV抗体阳性标本中抗原的检出率为22.6%;29份HCV抗体阴性标本中抗原的检出率为6.9%。两种样品检出率差异有统计学意义(χ2=6.128,P<0.05)。

  2.2 16份抗原阳性标本中HCV RNA阳性14份,75份抗原阴性标本中有2份RNA阳性者,二者符合率是70.3%。

  2.3 29份抗体阴性标本中检出抗原阳性2份,HCV RNA证实均为阳性。

责任编辑:wangpeng6151

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